产品货号:
BTN180809
中文名称:
羟基萘酚蓝溶液(LAMP显色)
英文名称:
Hydroxy Naphthol Blue Solution for LAMP,12mM
产品规格:
1mL
发货周期:
1~3天
产品价格:
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本制品是专门用于LAMP扩增显色的羟基萘酚蓝溶液,其浓度为12mM。本制品即开即用,可以直接加入到含Mg2+的LAMP扩增体系中使用。最佳用量根据LAMP体系不同需要用户自己优先选择,但一般终浓度为25μM左右,需要终浓度为0.5mM的Mg2+存在,并且Mg2+浓度跟标准LAMP反应的Mg2+浓度一样。

羟基萘酚蓝(HNB)是一种金属离子指示剂,HNB与镁离子结合使得反应体系初始颜色为紫罗兰色,随着反应的进行,镁离子与析出的焦磷酸根离子反应生成焦磷酸镁沉淀,羟基萘酚蓝失去了镁离子使得体系颜色变为天蓝色,而未反应的体系则仍保持着紫罗兰色。另外,HNB可以在LAMP反应前加入,有效的减少了反应污染的可能性。

组分 | 规格 |
羟基萘酚蓝溶液(12mM) | 1mL |
说明书 | 1份 |
保存:-20℃,有效期1年。

- 将本制品放置在室温融化30分钟,震荡10秒钟,短暂离心后放冰上待用。
- 按下表配制20μL体系的LAMP反应:
成分 样品管 阴性对照 4×LAMP Mix 5μL 5μL 自备FIP引物终浓度 0.8μM 0.8μM 自备BIP引物终浓度 0.8μM 0.8μM 自备F3引物终浓度 0.2μM 0.2μM 自备B3引物终浓度 0.2μM 0.2μM 自备Loop F引物终浓度(可选) 0.4μM 0.4μM 自备Loop B引物终浓度(可选) 0.4μM 0.4μM 自备模板DNA 1~100ng 不加 Bst DNA聚合酶(8U/μL) 1.5μL 1.5μL 自备MgCl2溶液,5mM 2μL 2μL 加本制品到终浓度 25μM左右 25μM左右 ddH2O 至20μL 至20μL - 65℃保温1小时。
- LAMP扩增后用肉眼观察,有核酸扩增的将变色,管中液体颜色由紫罗兰色变为天蓝色。没有扩增的将不变色,管中液体颜色仍为紫罗兰色。典型的实验结果如下图(左边为阴性结果,右边为阳性结果):
- 也可以电泳检测实验结果:取5~10μL扩增产物和自备的上样液混合,上样,进行2~3%的琼脂糖凝胶电泳,有LAMP扩增的样品将可见LAMP特征性电泳图谱。
- 强烈不推荐此法,因为电泳时产生的气溶胶非常容易污染环境,使得今后用同一引物扩增时产生假阳性。
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